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流式細胞術

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流式表抗-三標

貨號:GC1030

品牌:Servicebio

價格:¥105

規格:

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一、項目介紹

  流式表抗:使用抗原-抗體反應的原理,運用流式細胞儀,檢測細胞表面抗原或者胞內抗原的實驗方法。另外,對于同一樣品檢測不同種抗原,可以分為單標、雙標、三標。

  按照抗體是否直接標記熒光,可以分為直接標記法和間接標記法。

二、實驗流程

  1、收集細胞:棄去上清,加入1 mL PBS清洗一次,棄上清,再加入1 mL 0.25%胰酶消化細胞,待細胞變圓且有部分細胞懸浮,即加入PBS終止消化。用移液槍輕輕吹打細胞,使細胞懸浮。細胞懸液轉入離心管中,1500 rpm離心5 min收集細胞。

  2、PBS洗滌細胞:加入3 mL 4℃預冷的PBS完全重懸細胞,1500 rpm離心5 min,棄上清。沉淀震蕩混勻。

  3、抗體標記

  ①直接標記法標記:加入100 µL 直標抗體稀釋液(PBS配制),避光染色30 min。

  ②間接標記法標記:

  加一抗:加入100 µL一抗抗體稀釋液(PBS配制),室溫孵育60 min。

  加二抗:孵育完后用預冷的PBS洗滌1次,1500 rpm離心5 min,棄上清。加入100 µL二抗抗體稀釋液(PBS配制),避光室溫孵育30 min。

  4、PBS洗滌細胞:加入500 uL 4℃預冷的PBS完全重懸細胞,1500 rpm離心5 min,棄上清。沉淀震蕩混勻,用200 μL 的4℃預冷的PBS重懸細胞。
 

三、客戶提供信息

  1、提供抗體貨號及廠家

  2、細胞信息

  3、實驗要求
 

四、樣本寄送須知

  細胞常溫,血樣4℃運輸。
 

五、結果展示
 

  

流式表抗-單標結果

流式表抗-雙標結果

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