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染色

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網狀纖維染色

貨號:GP1038

品牌:Servicebio

價格:¥35

規格:

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  一、實驗器材及試劑

 

  1、實驗器材

名稱 廠家 型號
脫水機 武漢俊杰電子有限公司 JJ-12J
包埋機 武漢俊杰電子有限公司 JB-P5
病理切片機 上海徠卡儀器有限公司 RM2016
凍臺 武漢俊杰電子有限公司 JB-L5
組織攤片機 浙江省金華市科迪儀器設備有限公司 KD-P
烤箱 天津市萊玻瑞儀器設備有限公司 GFL-230
載玻片 Servicebio  
正置光學顯微鏡 日本尼康 Nikon Eclipse E100
成像系統 日本尼康 Nikon DS-U3

  2、主要實驗試劑

試劑名稱 廠家 貨號
無水乙醇 國藥集團化學試劑有限公司 100092683
二甲苯 國藥集團化學試劑有限公司 10023418
網狀纖維染液套裝 Servicebio G1049
中性樹膠 國藥集團化學試劑有限公司 10004160

  二、實驗步驟

 

  1、石蠟切片脫蠟至水:依次將切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-無水乙醇Ⅰ5min-無水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自來水洗。

  2、酸性高錳酸鉀染色:將高錳酸鉀與硫酸1:1混合成酸性高錳酸鉀,滴加該混合液處理5min,蒸餾水洗。

  3、草酸染色:滴加草酸漂白1-2min或者組織變成無色即可,蒸餾水洗3次。

  4、硫酸鐵銨染色:滴加硫酸鐵銨染色5-15min(避光),蒸餾水洗3次。

  5、銀染:取硝酸銀2ml,逐滴加入濃氨水,邊加邊搖勻,出現沉淀后繼續滴加濃氨水,至沉淀剛好溶解,加入NaOH 2ml,再次形成沉淀,逐滴加入濃氨水,至沉淀剛好溶解,加入蒸餾水定容至40ml,即為銀氨液。滴加銀氨液處理1-5min(避光),蒸餾水洗3次。

  6、還原染色:切片入10%的中性甲醛液還原1-3min(避光),蒸餾水洗3次。

  7、脫水封片:切片依次入無水乙醇I 5min -無水乙醇II 5min-無水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明,中性樹膠封片。

  8、顯微鏡鏡檢,圖像采集分析。

  三、結果判讀:

 

  網狀纖維呈黑色或者黑褐色,背景呈棕黃色。

  四、注意事項:

 

  1、銀氨液在避光4℃條件下可保存1-2月,使用前復溫,可根據配制后存儲時間的長短,在第4、5步適當延長染色時間,促使銀離子的結合。

  2、NaOH、硫酸和草酸可以不避光常溫保存,其余染色全部避光常溫保存。

  3、染色過程中,需要使用避光的染色盒進行染色。

  4、在配制銀氨液過程中,沉淀恰好溶解要嚴格控制。

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