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細胞檢測

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Cell Counting Kit-8(CCK-8試劑盒)

貨號:G4103-5

價格:¥350

規格: 5ml

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  產品簡介:

  Cell Counting Kit-8,簡稱CCK-8(或CCK8)試劑盒,是一種廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的快速、高靈敏度檢測的試劑盒。

  其檢測原理在于,試劑盒中含有類似于MTT的WST-8化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,WST-8可以被細胞內脫氫酶還原成水溶性的橙黃色甲瓚化合物。甲瓚量與活細胞數量成正比,即細胞增殖越多越快,則顏色越深;細胞毒性越大,則顏色越淺。對于同樣的細胞,顏色的深淺和細胞數目呈線性關系。

  本試劑盒可以用于外源細胞因子等誘導的細胞增殖檢測,以及藥物等對細胞有毒試劑誘導的細胞毒 性檢測,或一些藥物誘導的細胞生長抑制檢測。

  本試劑盒使用便捷,不需要配制或稀釋,無須收集細胞,無須洗滌細胞,也不需要對甲瓚化合物進行再次溶解,對于批量樣本的檢測非常方便。

  酚紅和血清對本試劑盒的測定無明顯影響。

  WST-8對細胞無明顯毒性。加入CCK-8溶液顯色后,可以在不同時間反復用酶標儀讀板,使檢測時間更加靈活,便于找到最佳測定時間。

  本試劑盒可以測定100/500個樣品。

  包裝內容:

產品貨號 產品名稱 規格
G4103 Cell Counting Kit-8 1 mL /5 mL

  保存條件:

  4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效。

  使用方法:

  1.細胞種板:每孔加入100 μL細胞懸液(約1000-5000個細胞),如果是進行細胞增殖實驗,每孔細胞數量不超過3000個;如果進行細胞毒性實驗,每孔細胞數量約5000個細胞,具體每孔所用的細胞的數目,需根據細胞的大小、細胞增殖速度的快慢等因素進行預實驗確定。按照實驗需要,進行培養并給予給藥處理,藥物體積不超過細胞懸液體積的1/10。

  2.加入CCK-8:待細胞處理結束后,每孔加入10 μL CCK-8溶液。如果起始的培養體積為200 μL,則需加入20 μL CCK-8溶液,其它情況以此類推。以空白細胞培養加入CCK-8溶液的孔作為空白對照。如果擔心所使用的藥物會干擾檢測,以加了空白細胞培養液、等量藥物和CCK-8溶液的孔作為溶劑對照,扣除藥物對結果的影響。

  3.孵育顯色:加好CCK-8的96孔板在細胞培養箱內繼續孵育0.5-4小時。

  4.測定結果:96孔板在酶標儀中于450 nm處測定吸光度。

  注意事項:

  1.本試劑盒檢測原理是依賴于脫氫酶催化的反應,所以還原劑(例如一些抗氧化劑)會干擾檢測,如果待檢測體系中存在較多的還原劑,需設法去除。

  2.確保孔內液體中沒有氣泡,否則會干擾檢測結果。

  3.由于本測試一般在96孔板中進行,如果培養時間較長,要注意液體蒸發問題。96孔板外側一圈孔內液體最易蒸發,可以采取向外圍一圈孔內加入等體積PBS、水或培養液。在培養箱中放置96孔板時,盡量靠近水源地方,以減緩液體蒸發。

  4.本產品僅限于科學研究用。

  5.為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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